Smad3促进大鼠卵巢颗粒细胞自噬

• 作者: 徐健 申春艳 董静霞
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: Smad3 卵巢颗粒细胞 自噬 免疫组织化学 免疫印迹法 大鼠
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 组织学胚胎学发育生物学
• 页码范围: 109-113
• 页数: 5页
• 分类号: R322
• 字数: 4196字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2014.01.021

摘要

目的 探讨Smad3基因对大鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响.方法 21d SD雌性大鼠腹腔注射孕马血清20 IU/只,48h后收集卵巢颗粒细胞进行原代培养.培养细胞分为3组:空白对照组:培养液中不加任何处理因素;敲低实验组:培养液中加入Smad3基因特异性的SiRNA及转染试剂RNAiMAX;过表达实验组:培养液中加入Smad3真核表达质粒及转染试剂Lip0 2000.免疫细胞化学方法鉴定培养细胞纯度;Western blotting方法检测Smad3蛋白表达变化,检测转染效率.Smad3基因敲低及过表达后,Western blotting方法检测自噬体膜形成标志蛋白LC3B及自噬调控相关蛋白Bcl-2的蛋白表达变化.结果 Smad3敲低时,LC3B蛋白Ⅱ型与Ⅰ型的比值(LC3BⅡ/Ⅰ)变化不明显,Bcl-2蛋白表达明显降低;Smad3过表达时,LC3BⅡ/Ⅰ明显增加,Bcl-2蛋白表达明显增加.结论 Smad3基因特异的SiRNA及真核表达质粒可以有效地转入大鼠卵巢颗粒细胞中,Smad3基因促进大鼠卵巢颗粒细胞自噬,其机制可能与Bcl-2蛋白相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐健	北京大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系	36	79	6.0	8.0
2	董静霞	北京大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系	15	54	5.0	6.0
3	申春艳	北京大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系	4	23	3.0	4.0