人结直肠肿瘤干细胞的分离培养与生物学特性

• 作者: 叶萍 李海 李玉奎 杨银学 王立斌 谢晓亮 马丽君
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 结直肠肿瘤 肿瘤干细胞 克隆细胞
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 345-349
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2014.04.013

摘要

目的 从人结直肠肿瘤细胞中分离培养结直肠肿瘤干细胞(Colon cancer stem cells)并研究其生物学特性.方法 采用有限稀释法筛选分离具有连续克隆能力的单细胞,通过MTT比色法对其体外增殖能力进行鉴定,流式细胞仪分析细胞表面标记CD133、CD166、CD24、CD47、CD200、CD90、CD44、EPCAM的表达情况;PCR检测Oct4、Sox2、Nanog、C-myc等相关基因的表达,实时荧光定量PCR检测其表达量.结果 三例能够形成肿瘤球的原代培养细胞CD166阳性细胞所占比例分别为61.9％、52.4％、47.8％,CD47阳性细胞所占比例分别为99.8％、97.2％、99.9％;不能形成肿瘤球的原代培养细胞中CD166阳性细胞为10.8％,CD47阳性细胞为0.1％;CD133、EPCAM、CD24、CD200四个表面标记在两种细胞中的表达均低于0.5％,CD44、CD90在两种细胞中的表达均高于95％;与原代细胞相比,克隆细胞具有较强的体外增殖能力并且高表达Oct4(P＜0.05)、C-myc (P＜0.01)及Sox2基因,不表达Nanog基因.结论 人结直肠肿瘤中存在具有自我更新和增殖潜能的结直肠肿瘤干细胞,在体外可将其分离、培养和纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王立斌	宁夏医科大学总医院干细胞研究所	32	69	4.0	6.0
2	李玉奎	宁夏医科大学总医院干细胞研究所	22	48	4.0	5.0
3	杨银学	宁夏医科大学总医院结直肠外科	53	157	7.0	8.0
4	马丽君	宁夏医科大学总医院干细胞研究所	10	34	4.0	5.0
5	李海	宁夏医科大学总医院结直肠外科	67	160	6.0	8.0
6	叶萍	宁夏医科大学总医院干细胞研究所	2	2	1.0	1.0
7	谢晓亮	宁夏医科大学总医院结直肠外科	1	0	0.0	0.0