热胁迫下棉花粉蚧内参基因的筛选

• 作者: 陆永跃 陈芳
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 棉花粉蚧 温度 热胁迫 内参基因 表达稳定性 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 1146-1154
• 分类号: Q966
• 语种: 中文

摘要

[目的]筛选出热胁迫下棉花粉蚧Phenacoccus solenopsis的实时定量PCR最适内参基因.[方法]本研究应用实时荧光定量PCR技术测定了棉花粉蚧2龄若虫、3龄若虫和雌成虫α-tub,β-tub,rpl32,GAPDH,SDHA和TBP共6个候选内参基因在7个不同温度处理(恒温18℃和32℃,以及37℃,39℃,41℃,43℃和45℃热激处理1h并在26℃恢复1h)下mRNA表达水平的稳定性;应用geNorm,Bestkeeper,Normfinder和RefFinder软件分析6个基因表达的稳定性.[结果]在不同高温胁迫下2龄若虫6个候选内参基因的稳定值M由小到大依次为α-tub(0.579)＜ GAPDH(0.654)＜TBP(0.663)＜β-tub(0.668)＜rpl32(0.675)＜SDHA(0.755),SD值排序为TBP(0.31)＜ α-tub(0.37)＜ rpl32(0.38)＜ SDHA(0.52) ＜β-tub(0.53)＜ GAPDH(0.57);3龄若虫6个候选内参基因的稳定值M由小到大依次为α-tub(0.542) ＜β-tub(0.596)＜TBP(0.618)＜GAPDH(0.655)＜SDHA(0.668)＜rpl32(0.749),SD值排序为α-tub(0.29) ＜β-tub(0.40) ＜rpl32(0.45)＜ TBP(0.49)＜GAPDH(0.50)＜SDHA(0.55);雌成虫6个候选内参基因的稳定值M由小到大依次为rpl32(0.554)＜α-tub(0.635)＜GAPDH(0.662)＜β-tub(0.666)＜ SDHA(0.704)＜ TBP(0.837),SD值排序为rpl32(0.31)＜α-tub(0.35)＜ GAPDH(0.44)＜TBP(0.44)＜β-tub(0.48)＜ SDHA(0.71).RefFinder综合排序结果表明,在7个不同温度处理下2龄若虫和3龄若虫中α-tub最稳定,雌成虫中rpl32最稳定.[结论]α-tub可作为棉花粉蚧2龄若虫和3龄若虫的内参基因,rpl32可作为雌成虫的内参基因.本结果为进一步开展热胁迫下棉花粉蚧热激蛋白基因的表达规律研究提供了参照.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆永跃	华南农业大学昆虫学系	270	3612	31.0	46.0
2	陈芳	华南农业大学昆虫学系	17	115	7.0	10.0