异硫氰酸荧光素标记鳗弧菌条件优化及应用条件对荧光信号的影响

• 作者: 王玉娟 王秀华 王锐 韩雯 黄健
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鳗弧菌 异硫氰酸荧光素 荧光标记 标记条件
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 593-600
• 分类号: S917.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48999

摘要

为了实现对目标细菌的有效示踪,实验以异硫氰酸荧光素(FITC)为标记物,分别设置FITC标记浓度0.2、2、20、50、100、200 μg/mL,标记时间1、15、30、60、120、240 min,研究了FITC标记浓度与标记时间对鳗弧菌标记效果的影响,同时对在不同温度(25、4、-20、-70℃)及不同时间(24、48、96、192 h)存储条件下鳗弧菌标记荧光的稳定性进行了比较,对标记鳗弧菌经甲醛灭活后的荧光变化进行了观察,研究了不同光照条件(0、150、1 500、25 000 lx)对标记鳗弧菌的荧光衰减影响,以及在-20和-70℃条件下反复冻融对标记鳗弧菌荧光强度的影响.结果表明,FITC的最适标记浓度范围为20 ～ 100 μg/mL,最适标记时间范围60～120 min,储藏在-20和-70℃条件下,标记后的鳗弧菌荧光信号比储藏在4和25℃条件下稳定,标记后的鳗弧菌经甲醛灭活后的荧光信号稳定性优于对照组,不同强度自然光照对标记鳗弧菌的荧光衰减效果不明显,标记细菌经3次冻融,发现在-70℃条件下冻存的细菌荧光信号稳定性保持良好.本研究结果为FITC用于标记海洋细菌提供了实用的技术参数.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王秀华	中国水产科学研究院黄海水产研究所	33	743	17.0	27.0
2	黄健	中国水产科学研究院黄海水产研究所	14	92	6.0	9.0
3	王锐	中国海洋大学海洋生命学院	6	23	3.0	4.0
5	王玉娟	中国水产科学研究院黄海水产研究所	5	31	4.0	5.0
8	韩雯	中国水产科学研究院黄海水产研究所	3	13	3.0	3.0