标准化Ames波动试验最佳条件的优选

• 作者: 周莉 孙祖越 李莹 王忠辉 管隽 贾玉玲 陈颖
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 医学
• 关键词: Ames波动试验 诱变试验 标准化 遗传毒性
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 199-203
• 页数: 5页
• 分类号: R965.3
• 字数: 3979字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2014.03.009

摘要

目的：建立Ames波动试验的标准化方法，为其应用于化合物的遗传毒性检测奠定基础。方法：应用4种已知具有遗传毒性的阳性化合物敌克松(Dexon)、叠氮钠(SA)、环磷酰胺(CP)和2-氨基芴(2-AF)进行Ames波动试验。比较2种不同的增菌方法和2种指示剂，建立Ames波动试验的方法。Dexon采用0.1、1和10μg/mL，SA采用0.01、0.1、1μg/mL在非活化条件下与相应的溶剂对照进行试验；CP采用10、100、1000μg/mL，2-AF采用0.1、1和10μg/mL在活化条件下与相应的溶剂对照进行试验；观察记录阳性孔数，根据情况调整阳性化合物的剂量，直到经统计分析后阳性孔数与溶剂对照组相比，差异有统计学意义(P<0.01)。确定各阳性化合物的剂量后，在相同剂量下重复试验3次，保证试验系统稳定可靠。结果：确定了Ames波动试验4种阳性化合物的剂量。在不加S9代谢活化系统的条件下， Dexon 3μg/mL和SA 0.05μg/mL，3块平行96孔板与溶剂对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)，对TA100呈现出强致突变作用；在加入S9代谢活化系统的条件下，CP 100μg/mL和2-AF 30μg/mL，3块平行96孔板与溶剂对照组相比差异均有统计学意义( P<0.01)，对TA100也呈现出强致突变作用。同时，在实验过程中改进了试验方法：包括对受试物剂量的标准化，改进了增菌培养的方法，并确定了指示剂。结论：建立了Ames波动试验方法，对已知阳性化合物测定结果的稳定性良好，并在研究中优化了实验条件。