日本沼虾过氧化物还原酶基因的克隆及其表达分析

• 作者: 傅洪拓 孙盛明 张世勇 戈贤平 朱健
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 日本沼虾 过氧化物还原酶 基因克隆 低氧胁迫 定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 474-483
• 页数: 10页
• 分类号: S917
• 字数: 5773字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2014.00474

摘要

利用 cDNA 末端快速克隆方法获得了青虾(Macrobrachium nipponense)的过氧化物还原酶基因(Prx)全长cDNA序列。该基因cDNA全长878 bp,包括72 bp的5′末端非翻译区,594 bp的开放阅读框(ORF),212 bp的3′末端非翻译区,开放阅读框编码198个氨基酸。氨基酸相似度比对显示,所分离的青虾过氧化物还原酶基因包括两个半胱氨酸残基的区域“FYPLDFTFVCPTEI”和“GEVCPA”。系统进化树分析表明,青虾过氧化物还原酶基因与南美白对虾(Litopenaeus vannamei)过氧化物还原酶聚在一起,具有最近的亲缘关系。荧光定量 PCR 检测显示,过氧化物还原酶基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量由低到高依次为肠道、心脏、卵巢、肌肉、鳃、肝胰腺。使用荧光定量PCR检测青虾在低氧胁迫和复氧条件下肝胰腺中的过氧化物还原酶基因mRNA的时空表达情况,结果显示,与对照组相比,实验组青虾过氧化物还原酶在肝胰腺和鳃组织中的表达量分别在低氧胁迫12~24 h 和复氧6 h出现了3次明显上调,由此推测过氧化物还原酶基因参与低氧应激分子过程。本研究结果可为进一步了解青虾低氧应激分子机制提供参考。