Zic3基因在小梅山猪骨髓间充质干细胞中的表达

• 作者: 张艳丽 樊懿萱 王强 王锋
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: Zic3基因 小梅山猪 真核表达 骨髓间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 111-116
• 分类号: S827
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/j.issn.1000-2030.2014.05.018

摘要

构建含有Zic3基因的真核表达载体pEGFP-Zic3,并转染小梅山猪骨髓间充质干细胞(BMSC),观察BMSC中Zic3的表达情况.用RT-PCR技术获得Zic3基因,并将其连接到真核表达载体pEGFP-C1中,获得真核表达载体质粒pEGFP-Zic3,采用双酶切法和DNA测序鉴定构建的载体是否正确.体外培养小梅山猪BMSC,通过免疫细胞化学法检测小梅山猪BMSC表面标志.采用脂质体法将pEGFP-Zic3转染BMSC,通过荧光显微镜观察确定重组质粒在小梅山猪BMSC内的表达和定位,用RT-PCR法检测Zic3的表达情况,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况.双酶切和测序证实已成功构建含目的基因Zic3的真核表达载体pEGFP-Zic3;小梅山猪BMSC体外培养状态良好,且表达CD29,不表达CD34和CD45; pEGFP-Zic3转染BMSC后可见大量绿色荧光,与对照组相比,转Zic3基因BMSC增殖能力提高,但细胞凋亡率未发生明显变化.结论:成功构建了含目的基因Zic3的真核表达载体pEGFP-Zic3,并高效转染BMSC,Zic3表达增加,且Zic3可提高细胞增殖能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张艳丽	南京农业大学江苏省家畜胚胎工程实验室	25	70	6.0	7.0
2	樊懿萱	南京农业大学江苏省家畜胚胎工程实验室	12	58	3.0	7.0
3	王锋	南京农业大学江苏省家畜胚胎工程实验室	172	854	17.0	21.0
4	王强	南京农业大学江苏省家畜胚胎工程实验室	11	117	5.0	10.0