基于高效液相色谱的喹(噁)啉类药物对刺参DNA甲基化水平的影响研究

• 作者: 刘云 刘慧慧 姜向阳 安红红 宋向军 宫向红 徐英江 田秀慧 邹荣婕
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 农学
• 关键词: 喹(噁)啉 刺参 DNA甲基化 高效液相色谱法
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 780-785
• 页数: 6页
• 分类号: O657.72|S482.48
• 字数: 4214字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2014.07.007

摘要

建立了高效液相色谱/紫外法测定刺参组织全基因组DNA甲基化水平的方法,并运用此方法对喹(噁)啉药物处理过的刺参样品DNA甲基化水平进行分析.色谱条件为:色谱柱为ZORBAX SB-Aq(4.6 mm× 250mm;5μm);柱温为30℃;检测波长为280 nm;进样量20μL;流动相为甲醇-7 mmol/L乙酸铵(7∶93),流速为1.0 mL/min.5-甲基脱氧胞苷和脱氧胞苷的质量浓度在0.05 ～ 1.0 mg/L范围内时,线性关系良好,相关系数(r)均为0.999 9.5-甲基脱氧胞苷和脱氧胞苷的检出限均为0.05 mg/L,在加标浓度为0.05,0.25,1.0 mg/L时,回收率为90.4％ ～ 100.6％,批内、批间相对标准偏差均小于4％.采用CTAB法提取刺参组织DNA,酶解后进行HPLC测定,结果表明:喹(噁)啉药物处理过的组织样品DNA甲基化水平低于对照组,该类药物通过改变DNA甲基化水平而影响基因的正常表达,可能是其产生遗传毒性的一种机制,建立的方法可以很好地用于全基因组DNA总甲基化水平的检测.