大鼠Egr-1探针的制备及应用

• 作者: 张艳美 徐涵 李伟秋 郑付春 郑燕珊
• 来源期刊: 汕头大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 探针 早期生长反应基因-1 心肌组织 基因 大鼠
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: R965
• 语种: 中文

摘要

目的:制备大鼠早期生长反应基因(Egr)-1分子探针,为进一步应用其研究Egr-1在病变组织的表达奠定基础.方法:提取大鼠心肌组织总RNA,PCR扩增基因片段,克隆入pGEM-T Easy载体,行酶切和基因测序.用随机引物DNA标记法制备α-32P标记的Egr-1和β-actin探针.Northern blot和Western blot法分析验证探针的信号强度及特异性.结果:PCR扩增所得目的基因片段大小与理论预期一致,测序证实获得基因序列与实验设计吻合.Northern blot显示该探针可检测心肌组织中目标mRNA水平,Western blot法检测到大鼠心肌组织中Egr-1蛋白的存在.结论:本研究成功制备大鼠Egr-1 cDNA探针,可用于进一步研究Egr-1与相关心血管疾病病理机制的关系.