结球甘蓝BoLH01和BoLH02基因的克隆与表达

• 作者: 任雪松 刘豫东 张林成 朱利泉 王小佳 蒲全明 高启国
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 甘蓝 叶片卷曲 基因克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种?种质资源?分子遗传学
• 页码范围: 1371-1379
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2014.01371

摘要

bHLH类转录因子在植物叶片形态建成和发育过程中发挥重要的生理功能。本文通过结球甘蓝转录组数据分析，筛选出莲座期和结球期的茎尖间与叶片间均显著差异表达的2个bHLH类转录因子，命名为BoLH01和BoLH02基因，获得了2个基因的编码序列，其中BoLH01基因CDS全长为966 bp、编码321个氨基酸；BoLH02基因CDS全长870 bp、编码289个氨基酸；序列分析表明BoLH01和BoLH02分别与拟南芥AtbHLH18和AtbHLH19氨基酸同源相似性最高，达81%和74%，均具典型bHLH结构域特点和完全保守的13E-16R和9H-13E-17R以及Leu23对应的关键氨基酸位点；分子进化上BoLH01、BoLH02与AtTCP2/3/4/10/24亲缘关系较近，与AtTCP9/11/14/15较远；转录组和荧光定量 PCR 分析表明 BoLH01和 BoLH02在平展的莲座叶中表达量较低，在卷曲的球叶中高量表达；序列分析BoHB7、BoHB12和BoILL6的ATG上游均包含能被bHLH功能域识别的E-box序列，对BoHB7、BoHB12和BoILL6荧光定量 PCR 分析表明，三者与 BoLH01和 BoLH02在不同时期叶片中表达量的变化趋势完全一致；说明 BoLH01和BoLH02可能通过正向调控BoHB7、BoHB12、BoILL6基因的表达来参与甘蓝叶片卷曲的调控。