C型凝集素受体树突细胞特异性捕获细胞间黏附分子3非整合素细胞表达模型的构建及功能研究

• 作者: 刘军 姚煦 张宇 王宝玺 顾汉艳
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 受体,有丝分裂原 重组融合蛋白质类 抗原,尘螨属 细胞系,肿瘤
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 457-460
• 页数: 4页
• 字数: 3781字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2014.07.002

摘要

目的 构建C型凝集素受体树突细胞特异性捕获细胞间黏附分子3非整合素(DC-SIGN)细胞表达模型,为后续进行DC-SIGN蛋白受体功能研究提供基础.方法 PCR扩增获得DC-SIGN分子的cDNA,克隆入真核表达载体p巨细胞病毒启动子-绿色荧光蛋白重组质粒(PCMV-EGFP),EGFP位于DC-SIGN N末端,转染人胚肾细胞癌HEK 293T细胞后,流式细胞仪检测DC-SIGN重组分子的表达,激光共聚焦显微镜检测DC-SIGN-EGFP融合蛋白的细胞定位情况,并进一步检测转染表达的DC-SIGN受体对过敏原抗原的识别和内吞过程.结果 构建的荧光融合蛋白重组表达质粒,经PCR及Western印迹证明DC-SIGN表达成功;经流式细胞仪检测转染DC-SIGN融合质粒的HEK293T细胞的DC-SIGN受体表达量增多(约50％).重组表达质粒转染293T细胞后,激光共聚焦显微镜检测显示,绿色荧光标记的DC-SIGN位于细胞膜上,可结合红色荧光素标记的过敏原抗原Derp2,并可将Derp2内吞入细胞内.结论 构建的DC-SIGN-EGFP融合蛋白在293T细胞内表达后具有细胞表面受体分子的特征性分布,可被DC-SIGN特异性抗体识别并具有摄取过敏原功能,是研究DC-SIGN分子功能的理想细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宝玺	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	108	541	13.0	17.0
2	姚煦	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	78	210	7.0	11.0
3	张宇	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	22	71	3.0	7.0
4	顾汉艳	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	2	4	1.0	2.0
5	刘军	南京大学医学院附属鼓楼医院皮肤科	30	66	4.0	6.0