人胰岛素原基因突变导致糖尿病机制的实验研究

• 作者: 冯凭 刘铭 崔景秋 张红艳 李宁
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 诱变,定点 质粒 转染 内质网应激 永久性新生儿糖尿病 胰岛素原错误折叠 β细胞功能衰竭
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 293-296
• 页数: 4页
• 分类号: R587.1|R349.64
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2014.04.002

摘要

目的：构建几种与人类糖尿病相关的人突变型胰岛素原质粒，并在大鼠胰岛素瘤细胞（INS-1）中进行表达。方法以野生型人胰岛素原质粒基因PCMS-EGFP/HWT为模板，设计并合成引物，利用定点突变技术，PCR生成PCMS-EGFP/H-C(B19)G、H-L(B11)P、H-R(S6)C、H-F(B25)L 4种单点突变质粒，对每个质粒进行序列测定验证定点突变成功，用脂质体2000将上述野生型、4种突变型质粒及空质粒分别转染INS-1细胞，放射免疫法检测各细胞培养液中人胰岛素水平。结果序列测定证实上述质粒定点突变成功, H-C(B19)G、H-L(B11)P、H-R(S6)C 3组突变细胞培养液中胰岛素水平低于野生型和H-F(B25)L组（P＜0.05），与空质粒组差异无统计学意义，且3组彼此间差异无统计学意义；H-F(B25)L组与野生型差异无统计学意义（P＞0.05）。结论成功构建并表达4种突变型人胰岛素原质粒，不同突变型胰岛素原可能通过不同机制导致糖尿病。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘铭	天津医科大学总医院代谢病科	23	121	6.0	10.0
2	崔景秋	天津医科大学总医院代谢病科	39	157	5.0	11.0
3	李宁	天津医科大学总医院代谢病科	60	243	8.0	12.0
4	冯凭	天津医科大学总医院代谢病科	145	1164	18.0	27.0
5	张红艳	天津医科大学总医院代谢病科	6	44	2.0	6.0