鹅生长激素基因的克隆、原核表达及其重组蛋白质的离子交换纯化

• 作者: 应诗家 施振旦 李辉 赵伟 陈蓉
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鹅 生长激素 原核表达 阴离子交换
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医?水产养殖
• 页码范围: 1387-1391
• 页数: 5页
• 分类号: S835.5
• 字数: 3447字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2014.06.032

摘要

为了克隆鹅生长激素基因并表达其重组蛋白质，采集生长期鹅垂体组织，并利用TRIzo1快速提取的总RNA为模板，反转录为cDNA.根据鹅生长激素基因编码的成熟肽序列(GenBank号：AY149895.2)设计1对引物，分别在上、下游引物的5忆端引入Nhe I和Hind III酶切位点.经反转录扩增获得鹅生长激素基因的编码的成熟肽全序列.通过双酶切和连接将鹅生长激素编码区插入原核表达载体pRSET-A的Nhe I和Hind III位点之间，构建重组表达质粒pRSET-gGH并转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3).转化的菌株经IPTG诱导后表达重组鹅生长激素蛋白质，分子量约为2.93×104.经过DEAE-650M弱阴离子交换树脂纯化获得较高纯度的重组鹅生长激素蛋白质.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵伟	江苏省农业科学院畜牧研究所	40	328	10.0	15.0
2	施振旦	江苏省农业科学院畜牧研究所	72	277	9.0	11.0
3	陈蓉	江苏省农业科学院畜牧研究所	5	10	2.0	3.0
4	应诗家	江苏省农业科学院畜牧研究所	17	66	6.0	7.0
5	李辉	江苏省农业科学院畜牧研究所	15	41	3.0	5.0