内质网应激反应对豚鼠脑缺血再灌注后听皮质区损伤的作用

• 作者: 习国平 徐鸥 王团 路虹 马宏敏
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉头颈外科
• 关键词: 内质网 动物实验 豚鼠 中枢神经系统疾病 大脑皮质 脑缺血再灌注
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 249-254
• 页数: 6页
• 字数: 3752字
• 语种: 中文

摘要

目的 观察豚鼠脑缺血再灌注后需肌醇酶1(inositol requiring enzyme 1,IRE1)、X盒结合蛋白1(Xbox binding protein 1,XBP-1)在其听皮层的反应以及血液中C反应蛋白(C reactive protein,CRP)和免疫球蛋白(immunoglobulin M,IgM)的变化,探讨内质网应激及血液免疫反应在脑缺血再灌注后听皮层神经元凋亡中的作用.方法 选取健康豚鼠20只,随机分为5组,每组各4只,分别为正常对照组、缺血15 min组、缺血再灌注6h组、缺血再灌注24 h组及缺血再灌注7d组.后四组在相同条件下采用夹闭双侧颈总动脉的方法来建立脑缺血再灌注损伤模型,对照组不予手术.缺血15 min组术后马上行听性脑干反应(ABR)测试,其余实验组待再灌注至对应的时间点后行ABR测试.心脏采血酶标记免疫吸附(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测血液CRP和IgM的浓度.断头取脑用免疫组织化学的方法测定IRE1、XBP-1表达.结果 ABR测试对照组为(10.0±2.47)dB SPL,缺血15 min组为(15±1.56) dB SPL,缺血再灌注6h组为(30±2.03) dB SPL,缺血再灌注24 h组为(30±1.67) dB SPL,缺血再灌注7d组为(15±1.14) dBSPL.缺血再灌注6h组与24 h组行f检验,无显著统计学差异,其余各组行方差分析,均有统计学差异(F=170.631,P＜0.01).ELISA法检测CRP对照组为(1198.96±50.81)μmol/ml,缺血15 min组为(1270.70±34.76) μmol/ml,缺血再灌注6h组为(1467.80±73.67) μmol/ml,缺血再灌注24 h组为(1352.83±175.71) μmol/ml,缺血再灌注7d组为(1252.56±41.32) μmol/ml.各实验组行方差分析均有统计学差异(F=6.564,P＜0.01).IgM对照组为(987.32±39.13)μmol/ml,缺血15 min组为(1064.90±39.78) μmol/ml,缺血再灌注6h组为(1118.03±57.75) μmol/ml,缺血再灌注24 h组为(1122.43±55.40) μmol/ml,缺血再灌注7d组为(1010.70±55.95) μmol/ml.缺血再灌注6h与24 h组行t检验无显著差异,其余各组行方差分析均有统计学差异(F=7.413,P＜0.01).HE染色显示各实验组凋亡细胞数目不等,对照组为2.6±1.13,缺血15 min组为14.1±2.71,缺血再灌注6h组为24.9±2.20,缺血再灌注24 h组为19.3±1.46,缺血再灌注7d组为9.4±1.17.各实验组行方差分析均有显著差异(F=109.666,P＜0.01).免疫组化结果显示各组IRE1、XBP-1均有显色.IRE1阳性颗粒数对照组为9.4±1.56,缺血15 min组为25.6±1.58,缺血再灌注6h组为60.3±1.57,缺血再灌注24 h组为42.2±2.13,缺血再灌注7d组为18.3±1.59;各实验组行方差分析均有显著差异(F=709.750,P＜0.01);XBP-1阳性颗粒数对照组为10.6±1.24,缺血15 min组为24.2±1.52,缺血再灌注6h组为61.4±1.7,缺血再灌注24 h组为41.1±2.38,缺血再灌注7d组为18.9±1.59;各实验组行方差分析均有显著差异(F=682.737,P＜0.01);IRE1与细胞凋亡率呈正相关(r=0.947,P=0.000);XBP-1与细胞凋亡率呈正相关(r=0.933,P=0.000);CRP与IRE1呈正相关(r=0.747,P=0.000);CRP与细胞凋亡率呈正相关(r=0.755,P=0.000);IgM与IRE1呈正相关(r=0.695,P=0.000);IgM与细胞凋亡率呈正相关(r=0.765,P=0.000).结论 在脑缺血再灌注损伤中,听皮层组织IRE1α、XBP1蛋白高表达,提示内质网应激参与了脑缺血再灌注损伤神经元细胞凋亡的发生发展,IRE1α和XBP1介导的信号转导通路是内质网应激导致脑缺血再灌注损伤神经元细胞凋亡的机制之一,脑缺血导致的听觉受损又有可能引起血液免疫学改变,内质网应激反应激发并加强了免疫炎性反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	路虹	河北医科大学第二医院耳鼻咽喉科	95	444	10.0	16.0
2	习国平	河北省邯郸市第三医院耳鼻咽喉科	26	84	5.0	8.0
3	王团	河北医科大学第二医院耳鼻咽喉科	4	20	3.0	4.0
7	徐鸥	河北医科大学第二医院耳鼻咽喉科	49	225	9.0	12.0
8	马宏敏		3	7	2.0	2.0