植物乳杆菌BBE7的胆盐水解酶基因在毕赤酵母中的分泌表达

• 作者: 堵国成 张娟 李华钟 李炳薰 董自星 陈坚
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 植物乳杆菌BBE7 胆盐水解酶 毕赤酵母 分泌表达 正交试验设计
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 107-111
• 页数: 5页
• 分类号: Q936|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1145.2014.00107

摘要

由于用大肠杆菌对植物乳杆菌来源的bsh基因进行胞内和胞外表达时,它们很容易形成包涵体,而且大肠杆菌的内毒素会显限制BSH的应用,所以利用毕赤酵母这一高效的表达系统对其进行了分泌表达.首先用融合PCR的方法将信号肽α-factor与BSH连接,然后再克隆到质粒pPIC9K上,得到重组质粒pPIC9K-a-factor-BSH.重组质粒经过SalI线性化后转化至毕赤酵母GS115.表达产物经SDS-PAGE分析和酶活测定发现,重组BSH的相对分子质量(M)和胞外酶活分别为37.0x103和1.08 U mL-1通过正交实验[L9(34)]对发酵条件优化后,胞外总酶活达到2.69 U mL-1,比原来提高了1.49倍.研究为胆盐水解酶的分离纯化、酶学性质研究以及大规模生产奠定了一定的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张娟		44	211	7.0	13.0
2	陈坚		447	6664	38.0	58.0
3	堵国成		339	3648	30.0	42.0
4	李华钟		63	592	13.0	22.0
5	董自星		2	0	0.0	0.0
6	李炳薰		1	0	0.0	0.0