利用反向双杂合系统分离干扰Ras-Raf相互作用的寡肽

• 作者: 付敏 刘秋云 唐曼 杜悦 潘利超 王淑丽 陈丽 黄艳
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 反向双杂合系统 寡肽 Ras-Raf相互作用 随机肽库 甘油/半乳糖选择培养基
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 58-63
• 页数: 6页
• 分类号: Q75|R73-36+2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2014.05.0114-6

摘要

目的:Ras/Raf代谢途径与癌症发生发展密切相关,但针对该途径的药物还不多.方法:结合反向双杂合系统和随机肽库对干扰Ras-Raf相互作用的寡肽进行了分离.首先构建了载体和嵌合基因库,然后对酵母进行了电激.对阳性克隆进行测序.结果:其中一个六肽EGPSGN对酵母在负选择培养基上的生长有一定促进作用.两个八肽TIARGPFE、FEGPSGNS在0.4 mmol/L时的抗癌作用比天蚕素和前人报道的干扰Ras-Raf相互作用的肽略高,均大于天蚕素2％和后者10％.结论:甘油(3％)/半乳糖(4％)选择培养基效果很好并分离到了阳性克隆,而前人建立的棉子糖/半乳糖选择培养基在该文的使用无效.该策略可增加基于Gal7突变株的经济的反向双杂合系统的应用范围.