白喉毒素突变体CRM197在白喉杆菌中的表达纯化

• 作者: 宇学峰 常云松 朱涛 段磊 毛慧华 邓立功 邵忠琦
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: CRM197白喉杆菌 接合转移 可溶蛋白 铁调控 阴离子柱
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 182-186
• 语种: 中文

摘要

CRM197是一种白喉毒素突变体,第52位的甘氨酸突变为谷氨酸,作为载体蛋白广泛用于疫苗开发.将阐述一种新的生产CRM197方法.将合成的CRM197基因片段克隆到表达载体pCKM4.1中,表达质粒pCKM5.1电转化至大肠杆菌E.coliS17-1中,通过结合转移转化至白喉杆菌(ATCC(R) 27010TM的白喉杆菌)中,载体上的导肽序列可以使得CRM197作为可溶性蛋白分泌到胞外表达,CRM197蛋白可占到菌体总蛋白的70％.增强对铁的调控,进一步优化培养基及发酵条件以提高产量.经过Q膜、硫酸铵沉淀、阴离子交换纯化步骤获得纯度达到95％的CRM197样品,提高了蛋白得率,节约了纯化时间和成本.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱涛		16	16	2.0	2.0
2	邵忠琦		2	2	1.0	1.0
3	邓立功		1	2	1.0	1.0
4	段磊		1	2	1.0	1.0
5	常云松		1	2	1.0	1.0
6	毛慧华		1	2	1.0	1.0
7	宇学峰		1	2	1.0	1.0