C1QBP基因在绒毛膜癌耐药细胞株中的表达及其与耐药的关系

• 作者: 任彤 向阳 杨隽钧 沈晓燕 沈芸 沙桂华 韩冰
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 关键词: 绒毛膜癌 载体蛋白质类 线粒体蛋白质类 细胞系,肿瘤 抗药性,肿瘤 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 616-620
• 页数: 5页
• 字数: 4601字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2014.08.012

摘要

目的 检测补体成分1Q亚成分结合蛋白(C1QBP)基因在绒毛膜癌(绒癌)耐药细胞株及其亲本细胞株中的表达差异,探讨以C1QBP基因为靶向的RNA干扰能否有效逆转绒癌耐药细胞株对相应化疗药物的耐药性.方法 (1)通过实时荧光定量PCR技术、蛋白印迹法和细胞免疫荧光法检测绒癌耐药细胞株,即氟脲嘧啶脱氧核苷(FUDR)耐药细胞株JeG-3/FUDR、甲氨蝶呤(MTX)耐药细胞株JeG-3/MTX、依托泊苷(VP-16)耐药细胞株JeG-3/VP、放线菌素D(ACTD,又称KSM)耐药细胞株JeG-3/KSM细胞,以及亲本细胞株JeG-3细胞中C1QBP mRNA和蛋白的表达及蛋白定位.(2)靶向构建C1QBP基因的短发夹状RNA(shRNA),包装成C1QBP基因RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体,即C 1QBP-RNAi-LV,转染绒癌耐药细胞,实时荧光定量PCR技术及蛋白印迹法检测转染后绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR细胞和亲本细胞株JeG-3细胞中C1QBP mRNA和蛋白的表达,活细胞计数(CCK-8)法检测各绒癌耐药细胞的药物敏感性的变化.结果 (1)转染前绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR、JeG-3/MTX、JeG-3/VP、JeG-3/KSM细胞中C1QBP mRNA表达水平分别为2.520±0.680、1.770±0.230、1.940±0.090、1.740±0.350,均明显高于亲本细胞株JeG-3细胞(为1.000),差异均有统计学意义(P＜0.05).4种绒癌耐药细胞中C1QBP蛋白表达强度均高于亲本细胞株JeG-3细胞;绒癌耐药细胞和亲本细胞中均存在C1QBP蛋白的表达,均定位于细胞内的线粒体.(2)转染后绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR细胞中C1QBP mRNA表达水平下调了93.1％(P＜0.01),C1QBP蛋白表达完全被抑制.(3)转染后绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR、JeG-3/MTX、JeG-3/VP和JeG-3/KSM细胞的耐药指数较其相应RNAi阴性对照分别下降了86.3％、93.9％、92.8％和89.9％,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 C1QBP基因在绒癌耐药细胞株中表达明显增高,沉默C1QBP基因表达可以有效逆转绒癌耐药细胞株对相应化疗药物的耐药性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨隽钧	中国医学科学院北京协和医院妇产科	20	87	6.0	9.0
2	向阳	中国医学科学院北京协和医院妇产科	129	1201	18.0	30.0
3	韩冰	中国医学科学院北京协和医院妇产科	23	65	5.0	7.0
4	任彤	中国医学科学院北京协和医院妇产科	22	336	7.0	18.0
5	沈晓燕	北京大学人民医院妇产科	6	29	3.0	5.0
6	沙桂华	中国医学科学院北京协和医院妇产科	4	31	3.0	4.0
7	沈芸	中国医学科学院北京协和医院妇产科	4	4	1.0	1.0