荧光标记基因转化棉花黄萎病菌及标记菌系选育

• 作者: 光杨其 唐灿明 张金凤 王晓楠 齐宏
• 来源期刊: 棉花学报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花 大丽轮枝菌 绿色荧光蛋白 红色荧光蛋白 转化
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究与进展
• 页码范围: 221-227
• 页数: 7页
• 分类号: S435.621
• 字数: 5207字
• 语种: 中文

摘要

为了研究黄萎病菌的侵染机制,通过农杆菌介导的转化方法,将绿色荧光蛋白基因sGFP导入落叶型黄萎病菌VD07038,将红色荧光蛋白基因mCherryRFP导入非落叶型黄萎病菌Bp2中,分别获得了具有绿色、红色荧光信号的阳性转化子.经过分子验证和连续继代培养,证明了这些转化子具有遗传稳定的对潮霉素的抗性.通过对转化子的菌落形态、生长速度和致病力进行检测,发现大部分转化子与野生型基本一致,少量转化子发生变异,其中转化子Bp2R-30不能产生微菌核,致病力显著下降.利用荧光显微镜观察了转化子VD07038G-10在感病棉花品种苏棉22幼苗根部的侵染情况.结果表明,在接菌12h后VD07038G-10的孢子可吸附在根表面;接种7～9 d后,菌丝入侵到棉花根部的维管组织.本研究获得的荧光蛋白标记的棉花黄萎病菌VD07038G-10可用于实时观测黄萎病菌侵染棉花根系的过程,并且可以定量鉴定不同棉花品种对该菌系的抗性,为棉花黄萎病菌抗性鉴定提供一种新方法.