截短猪流行性腹泻病毒N蛋白的可溶性表达及其抗原活性

• 作者: 孙泰然 宋勤叶 朱卫霞 李丽敏 李潭清 袁万哲
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 可溶性原核表达 抗原活性
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1561-1566
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.09.026

摘要

应用原核表达系统表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白,并探讨其抗原活性.通过RT-PCR扩增截短的PEDV N蛋白(truncated N protein,tN蛋白)基因i构建包含tN蛋白基因的原核表达质粒(pET32a-PEDV-tN),将质粒转化E.coli BL21感受态细胞,诱导表达目的蛋白;通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组tN蛋白的表达及其免疫反应原性;用提纯的tN蛋白皮下接种BLAB/c小鼠,通过ELISA和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)检测重组tN蛋白的免疫原性.结果应用RT-PCR扩增到了预期705 bp的tN蛋白基因;在E.coli BL21内,携带tN蛋白基因的重组质粒能够以可溶性表达形式诱导表达重组tN蛋白;该蛋白在体外可以与猪抗PEDV抗体特异性结合,能够诱导小鼠产生特异性抗体.本研究应用原核表达系统实现了截短猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白的可溶性表达,该蛋白具有良好的完全抗原活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁万哲	河北农业大学动物医学院河北省兽用生物制品工程技术研究中心	76	296	8.0	14.0
2	李潭清	河北农业大学动物医学院	31	238	9.0	14.0
3	宋勤叶	河北农业大学动物医学院河北省兽用生物制品工程技术研究中心	35	250	9.0	14.0
4	朱卫霞	河北农业大学动物医学院河北省兽用生物制品工程技术研究中心	7	35	3.0	5.0
5	李丽敏	河北农业大学动物医学院河北省兽用生物制品工程技术研究中心	16	72	5.0	8.0
6	孙泰然		7	22	2.0	4.0