拟南芥SEPALLATA3蛋白质原核表达与纯化

• 作者: 周佳平 徐英武 林新春
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 植物学 SEP3蛋白 原核表达 蛋白纯化 多聚体
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 页码范围: 14-18
• 页数: 5页
• 分类号: S601|S718.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.11833/j.issn.2095-0756.2014.01.003

摘要

SEPALLATA3(SEP3)属于花器官建成ABCE模型中的E类基因,为了揭示SEP3蛋白是如何形成多聚体的,以及多聚体与其生物学功能之间的联系,开展了拟南芥A rab idopsis thaliana AtSEP3蛋白质体外可溶性表达实验,构建了原核表达载体,并在大肠埃希菌Escherichia coli细胞中进行重组蛋白的诱导表达.从蛋白不同的结构域、诱导时间和诱导温度等方面对蛋白的可溶性表达进行了分析.最后以pET-15b为表达载体,大肠埃希菌表达菌株Ecoli‘Rosetta’为宿主菌株,22℃诱导表达15 h,获得不同片段的AtSEP3可溶性蛋白.通过镍柱及分子层析色谱柱分离纯化,表明AtSEP3蛋白以四聚体形式存在.