犬瘟热病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 李菊梅
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 犬瘟热病毒 F基因 SYBR Green Ⅰ 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 58-62
• 页数: 5页
• 分类号: S811.6
• 字数: 3837字
• 语种: 中文

摘要

为建立犬瘟热病毒(CDV) SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法,采用RTPCR扩增CDV F基因269 bp片段,并克隆入pMD18-T载体中,以纯化的重组质粒为模板作荧光定量PCR扩增,建立了CDV荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达1.6×101拷贝/μL,与犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV-1)、犬冠状病毒(CCV)、犬副流感病毒(CPIV)均不发生交叉反应,具有很好的特异性和重复性.结果表明:建立的CDV实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床犬瘟热(CD)的检测.