基因枪介导的海岛棉(Gossypium barbadense L.)茎尖遗传转化体系的建立

• 作者: 何兰兰 孙杰 张薇 朱华国 柴蒙亮 马玲玲 魏延宏
• 来源期刊: 棉花学报
• 学科: 农学
• 关键词: 海岛棉 基因枪法 茎尖 遗传转化
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究与进展
• 页码范围: 213-220
• 页数: 8页
• 分类号: S562.035
• 字数: 6042字
• 语种: 中文

摘要

以新疆海岛棉品种新海13号的茎尖为转化受体,采用基因枪介导法,研究DNA包裹浓度、微载体种类、前渗处理时间、轰击条件、筛选方法等对茎尖转化的影响,建立了基因枪法介导的海岛棉茎尖转化体系.研究结果表明,采用1.5μg· μL-1的质粒DNA包裹1.0 μm金粉微载体,前渗处理12h,轰击压力为7.584 MPa(11 00 psi),轰击距离为6 cm,后渗处理16h,恢复处理24 h,在120 mg·L-1卡那霉素浓度下直接筛选35 d.在添加4 g·L-1活性炭粒的生根培养基中诱导抗性幼苗生根,获得抗性再生植株.通过PCR和RT-PCR检测,共得到5株转抗除草剂基因EPSPS的阳性植株.该研究体系的建立为海岛棉的遗传转化奠定了基础,为海岛棉的育种工作提供了材料.