慢病毒载体介导的层黏连蛋白受体稳定抑制细胞株的建立

• 作者: 周晓巍 朱旭东 武瑞琴 黄培堂
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 层黏连蛋白受体 慢病毒载体 RNA干扰 HeLa细胞
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 796-799
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3024字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.06.010

摘要

目的：构建靶向层黏连蛋白受体（LR）基因的小发卡RNA（shRNA）慢病毒表达载体，鉴定其对LR的抑制效果，并筛选LR稳定抑制的HeLa细胞株。方法：设计针对LR的shRNA序列，将此序列和H1启动子克隆入含有EGFP报告基因的pLenti6/v5慢病毒表达载体，通过病毒包装、细胞感染、抗生素筛选获得稳定细胞株，用real-time PCR和Western印迹检测筛选得到的稳定细胞株中LR的表达水平。结果和结论：构建了含有LR靶向shRNA的慢病毒表达载体，包装成病毒后感染HeLa细胞，经抗生素筛选后获得了稳定抑制LR的细胞株；筛选后的细胞均可观察到报告基因EGFP的表达；经mRNA和蛋白水平检测，LR-sh6和LR-sh7均可显著抑制HeLa细胞株中LR的表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄培堂	军事医学科学院生物工程研究所	190	1493	20.0	30.0
2	周晓巍	军事医学科学院生物工程研究所	43	220	8.0	13.0
3	朱旭东	军事医学科学院生物工程研究所	28	118	6.0	9.0
4	武瑞琴	军事医学科学院生物工程研究所	14	27	3.0	4.0