人PIF1及其截短体重组蛋白的真核表达及其细胞内定位

• 作者: 刘旭 刘晓丹 周平坤 张莹 李珊珊 王建校 王豫 顾永清
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 解螺旋酶 PIF1 重组质粒 蛋白表达 免疫荧光 真核表达
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 595-598,699
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201405006

摘要

目的 构建人PIF1及其C末端解螺旋酶模序(PIF1C)和N末端PINT结构域(PIF1N)截短体真核表达重组质粒,进行真核表达,并确定PIF1、PIF1C、PIF1N在细胞内定位.方法 以HeLa cDNA为模板PCR获取PIF1、PIF1C、PIF1N编码区cDNA,将其插入pCMV-Tag 2B质粒中构建PIF1、PIF1C、PIF1N真核表达重组质粒;通过lipofectamine2000将重组质粒转染人293细胞中,Western blot方法检测其在真核细胞内的表达,用免疫荧光法检测其细胞内定位.结果 成功构建了PIF1及其截短体真核表达重组体,并在真核细胞内成功表达.确定PIF1定位于核内,PIF1C定位于整个细胞,呈弥散分布,PIF1N主要定位于核内.结论 在真核细胞中成功表达了PIF1、PIF1C、PIF1N,且发现PIF1N对PIF1的入核起重要作用,为进一步研究其PIF1及其各结构域奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周平坤	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	108	511	11.0	16.0
2	刘晓丹	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	32	118	5.0	10.0
3	王豫	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	19	40	3.0	4.0
4	李珊珊	石河子大学医学院	6	19	2.0	4.0
5	刘旭	石河子大学医学院	2	4	2.0	2.0
6	张莹	石河子大学医学院	2	2	1.0	1.0
7	王建校	石河子大学医学院	4	5	2.0	2.0