泥鳅β-actin启动子介导的革胡子鲶GH重组基因的构建及启动活性研究

• 作者: 徐琪 李相赫 薛松磊 金铁根 陈国宏 陈阳
• 来源期刊: 水产学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 泥鳅 β-actin启动子 革胡子鲶鱼GH基因 显微注射
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: S917
• 字数: 4711字
• 语种: 中文

摘要

为获得快速生长的泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus），研究了泥鳅β-actin基因启动子介导的革胡子鲶（Clarias gariepinus）生长激素（growth hormone，GH）重组基因。采用PCR和RT-PCR技术克隆泥鳅β-actin基因近端启动子、3′-UTR及革胡子鲶GH基因编码区，构建一个长为2418bp的GH重组基因DPRK。首先，构建了以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因作为报告基因的重组表达载体pAF（pβ-actin promoter-EGFP），然后转染DF1真核细胞，同时经酶切线性化后显微注射到斑马鱼（Danio rerio）和泥鳅的受精卵中，以评价泥鳅β-actin启动子的启动活性。其次，将重组基因DPRK显微注射到泥鳅受精卵中。结果显示：泥鳅β-actin启动子能在DF1细胞、斑马鱼和泥鳅的受精卵中启动绿色荧光蛋白的表达；泥鳅的荧光表达率（78.44%）显著高于斑马鱼（29.62%）；泥鳅受精卵显微注射DPRK 20d后，在mRNA水平检测到GH基因的表达。这表明泥鳅β-actin基因近端启动子具有显著的启动活性，且重组基因DPRK能在泥鳅体内表达，为下一步泥鳅的基因工程育种奠定了理论基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈国宏	扬州大学动物科学与技术学院	393	3876	28.0	46.0
2	徐琪	扬州大学动物科学与技术学院	178	1010	15.0	26.0
3	陈阳	扬州大学动物科学与技术学院	52	137	6.0	9.0
4	薛松磊	扬州大学动物科学与技术学院	6	13	3.0	3.0