一个有利于细胞色素P450 BM-3催化吲哚合成靛蓝的三位点突变酶:D168L/E435T/V445A

• 作者: 姚善泾 张彭湃 梅乐和 胡升 金志华 雷引林
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 生物催化 酶 分子生物学 P450 BM-3 吲哚 羟基化 靛蓝
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 1374-1380
• 页数: 7页
• 分类号: TQ962.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0438-1157.2014.04.030

摘要

为进一步提高P450 BM-3催化吲哚合成靛蓝的能力,在前期获得的突变酶D168L/E435T基础上引入V445A突变,获得突变酶D 168L/E435T/V445A,该突变酶与D168L/E435T及V445A相比,对吲哚的亲和力分别降低41.5％及35.8％,转化数(tcat)分别提高1.61倍及1.31倍,催化效率(kcatKm-1)分别提高1.53倍及1.47倍;该突变酶对电子的耦合率也提高至24.7％,较D168L/E435T提高39.5％,较V445A提高64.7％,说明该突变酶在电子的利用率上有明显改善;此外,该突变酶催化副产物靛玉红的比例大幅降低,降低为D168L/E435T的41.7％及V445A的30.6％,说明该突变酶催化吲哚的区域选择性上也更加有利于靛蓝形成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚善泾	浙江大学生物工程研究所	224	2284	23.0	34.0
2	梅乐和	浙江大学生物工程研究所	61	1024	17.0	30.0
6	金志华	浙江大学宁波理工学院生物与化学工程学院	49	483	14.0	20.0
7	张彭湃	浙江大学生物工程研究所	1	1	1.0	1.0
8	胡升	浙江大学宁波理工学院生物与化学工程学院	22	310	7.0	17.0
9	雷引林	浙江大学宁波理工学院生物与化学工程学院	15	91	6.0	9.0