鸡不同生精细胞中Piwil1基因启动子区DNA甲基化差异研究

• 作者: 夏明秀 常国斌 徐琪 李建超 王洪志 翟飞 陈蓉 陈静 马腾
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 Piwil1基因 甲基化 精子发生
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1404-1409
• 页数: 6页
• 分类号: S831.2
• 字数: 3598字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.09.004

摘要

旨在通过检测不同类型生精细胞中Piwil1基因的转录水平和启动子区甲基化状态,为深入探讨该基因在鸡精子发生过程中的转录调控机制奠定基础.通过荧光定量PCR技术检测Piwil1基因在不同生精细胞的mRNA表达水平,同时采用Bisulfite sequencing PCR法对启动子区进行甲基化修饰、转化和克隆测序,分析甲基化状态.结果发现,鸡Piwil1基因在精子中几乎不表达,在精原细胞的表达量显著高于PGCs、SSCs和四倍体(P＜0.01).鸡Piwil1基因启动子区-233～+298 bp存在1个CpG岛,该岛有56个CpG位点.第1～10个CpG位点(-233～-129 bp区域),精子细胞、四倍体细胞、PGCs、SSCs中处于未甲基化状态,而精原细胞中甲基化比例高达0.600;第39～55个CpG位点(+105～+252 bp区域),不同细胞中的甲基化水平差异显著,精原细胞中仅为0.212. PGCs、SSCs中DNA高甲基化在一定程度上抑制了Piwil1基因的表达.研究表明:在+105～+252 bp非编码区域甲基化可能对Piwil1基因转录调控有一定影响,但还存在其他转录调控机制.