猪去乙酰化酶SIRT2的克隆表达

• 作者: 司徒嘉欣 张玲华 施巨清 杨军 楚品品 江学斌 肖淑君 蔡海明 马苗鹏
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪 SIRT2 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-18
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2014.02.0030

摘要

目的:原核表达猪去乙酰化酶SIRT2(sirtuin 2,SIRT2).方法:采用RT-PCR扩增包含SIRT2的完整编码序列;通过酶切连接将SIRT2完整编码序列克隆至表达载体pET28a(+)中,转入大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达和亲和层析纯化;经免疫印迹Western-blotting分析初步评价SIRT2的抗原性和特异性.结果:重组原核表达质粒pET28a-SIRT2经测序证明构建正确,表达的重组蛋白相对分子质量约47kDa,能被相关抗体所识别.结论:具有免疫原性的猪去乙酰化酶SIRT2在大肠杆菌中成功表达,可以此为基础进一步研究猪的SIRT2.