用生物素标记探针和链亲和素磁珠分离HLA-A、-B、-C位点单体型

• 作者: 何吉 吕杭军 和艳敏 朱发明 王炜 章伟 陶苏丹
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 关键词: 人类白细胞抗原 生物素探针 链亲和素磁珠 单体型分离
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 383-387
• 页数: 5页
• 字数: 3450字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9406.2014.03.028

摘要

目的 建立生物素标记探针和链亲和素磁珠分离人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-A、-B、-C单体型的技术,以解决HLA分型过程中部分模棱两可的结果.方法 根据IMGT/HLA数据库中HLA等位基因的序列信息,设计5'端生物素标记探针.将探针与104份标本基因组DNA混合杂交,然后加入链亲和素磁珠孵育,形成链亲和素磁珠-生物素探针-单链DNA复合物,通过洗涤和解析从而实施有效的分离.对分离出的单体型基因组DNA进行HLA-A、-B或-C位点扩增和测序分析.结果 设计的12个HLA-A、19个HLA-B、13个HLA-C位点探针中,经测序证实分别有9个、9个、5个探针成功分离了单链DNA标本.结论 建立的探针和磁珠分离HLA-A、-B、-C单体型技术具有可行性,可以解决HLA测序分型中部分模棱两可结果,提高分型的准确性.