大鼠海马组织RNA、DNA和蛋白质共提取方法的研究

• 作者: 倪磊 杨娟 王爱英 胡丽丽 赵小鸽
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: Trizol 海马 RNA DNA 蛋白质
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 技术方法研究
• 页码范围: 276-280
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201402029

摘要

目的 探讨Trizol法同时提取大鼠单侧海马组织RNA、基因组DNA和蛋白质的可行性及优势.方法Trizol法提取成年雄性Sprague-Dawley大鼠单侧海马组织RNA、基因组DNA以及蛋白质; 商业化试剂盒提取另一侧海马组织基因组DNA,RIPA裂解液提取蛋白质.用超微量分光光度计和SYBR实时定量RT-PCR法检测Trizol法提取的RNA的质量,利用超微量分光光度计和聚合酶链式反应(PCR)法比较两种方法提取DNA的效果及质量,采用Western blot法比较两种方法提取蛋白质的效果.结果 Trizol法提取单侧海马RNA的质量浓度介于1178.3～2225.8ng/μL之间,A260/280介于2.01～2.03,A260/230介于1.88～2.22,并获得了稳定的β-actin和GR循环域值.Trizol法和试剂盒提取单侧海马DNA的质量浓度分别介于215.7～271.8ng/μL和268.6～872.5ng/μL之间,均适于充当PCR反应模板.Trizol法和RIPA裂解液提取的蛋白质在Western blot法检测目的 蛋白含量的过程中均呈现清晰的条带.结论 Trizol法提取大鼠单侧海马组织RNA的同时提取的DNA和蛋白质,与商业化试剂盒和RIPA裂解液从不同海马组织中分别提取基因组DNA和蛋白质的效果相当.采用Trizol法同时提取海马组织的RNA、DNA和蛋白质,不仅提高了实验效率、节约了实验成本,而且有效避免了因反复实验操作带来的人为干扰及误差.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	倪磊	西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系	18	160	6.0	12.0
2	王爱英	西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系	8	27	4.0	4.0
3	胡丽丽	西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系	2	4	1.0	2.0