南瓜SRAP反应体系的建立与优化

• 作者: 卢丽芳 朱海生 林义章 温庆放
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 南瓜 SRAP 分子标记 PCR扩增
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 园艺科学
• 页码范围: 40-46
• 页数: 7页
• 分类号: S642
• 字数: 5157字
• 语种: 中文

摘要

以‘密本’南瓜作为筛选体系的材料，通过单因素试验对南瓜20μL SRAP-PCR扩增体系的Mg2＋、dNTP、 Taq酶、引物及DNA浓度和扩增程序的退火温度与循环次数进行优化，筛选出各组分的最佳浓度、最佳的退火温度和最佳循环次数。试验结果确立南瓜最佳的20μL SRAP体系为：0.2 mmol · L -1 dNTP ，1.5 U Taq酶，80 ng DNA ，0.16μmol·L -1的单条引物，Mg2＋1.5 mmol·L -1，2μL 10×Buffer ；最佳扩增程序为：94℃预变性5min；94℃1 min ，35℃1 min ，72℃1 min ，5个循环；94℃1 min ，52℃1 min ，72℃1 min 35个循环；最后72℃延伸10 min。选用17个南瓜品种对确立扩增体系及扩增程序进行验证，检测结果表现为扩增产物条带清晰明亮、多态性丰富、特异性强、重复性好，表明本试验所确定的反应体系及反应程序适用于南瓜的SRAP分子标记。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	温庆放	福建省农业科学院作物研究所	108	864	14.0	25.0
7	林义章	福建农林大学园艺学院	77	941	15.0	27.0
8	朱海生	福建省农业科学院作物研究所	53	277	10.0	14.0
17	卢丽芳	福建农林大学园艺学院	2	18	2.0	2.0