小鼠胰腺腺泡细胞钙振荡的激光共聚焦成像研究方法

• 作者: 吴杰 孙娜娜 孙芳芳 沈建新 王海燕 王静柯 赵梦琴
• 来源期刊: 中国应用生理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钙振荡 胰腺腺泡细胞 乙酰胆碱 激光共聚焦成像 小鼠
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 373-377
• 页数: 5页
• 分类号: R33-33
• 字数: 4179字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13459/j.cnki.cjap.2014.04.022

摘要

目的:建立一种简易高效的成年小鼠胰腺腺泡细胞钙振荡的激光共聚焦成像研究方法.方法:取成年昆明小鼠胰脏,用胶原酶法急性分离得胰腺腺泡细胞,加荧光染料fluo-4-AM标记胞内钙;以乙酰胆碱(ACh)为兴奋剂作用于胰腺腺泡细胞,激光扫描共聚焦显微镜发射488 nm激光并同步、实时、动态地记录此过程中胰腺腺泡细胞产生的钙振荡.结果:①一定浓度的ACh(如100 nmol/L)可稳定地激发胰腺腺泡细胞产生典型钙振荡,且此钙振荡可被阿托品完全阻断;②胞浆内不同部位的钙振荡有强弱不同,但呈同步变化节律;而不同细胞间的钙振荡强弱和节律往往不同;③钙振荡的幅度和节律与Ach具有剂量依赖效应.结论:小鼠胰腺腺泡细胞钙振荡的激光共聚焦成像研究方法简单易行、直观形象、高效、灵活,可作为常规方法使用,具有良好的应用前景和推广价值.