转录水平RNA干扰肝素酶基因对肝癌细胞侵袭能力的影响

• 作者: 叶明 张彩虹 朱建华 李秋文 段昕妤 王如良 肖文华 董伟伟 赵惠霞 郝怡鑫
• 来源期刊: 临床肿瘤学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转录水平沉默 转录后水平沉默 肝素酶基因 肝癌细胞 侵袭
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 391-395
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 4087字
• 语种: 中文

摘要

目的：探讨转录水平基因沉默（ TGS）技术和转录后水平基因沉默（ PTGS）技术对肝素酶（ HPA）基因干扰效果及其对肝癌SMCC-7721细胞侵袭能力的影响。方法从HPA基因启动子区和编码区分别设计并合成TGS和PTGS的小干扰RNA（ siRNA），并转染肝癌细胞SMMC-7721；实时半定量PCR和Western blotting检测TGS和PTGS siRNA转染后48、72和96h HPA的表达，并设空白组作为对照；Transwell小室实验检测干扰后SMMC-7721细胞的侵袭能力。结果 TGS和PTGS两种技术在转染48h后，从mRNA和蛋白水平上均能成功干扰HPA表达；转染后72h，PTGS组HPA恢复表达，而TGS组仍保持沉默；转染后96h，两组HPA均恢复表达。 Transwell小室实验表明，TGS和PTGS组HPA基因均能使SMCC-7721的穿膜细胞数减少，TGS组效果更明显。结论 TGS技术沉默肝癌SMMC-7721细胞中HPA基因的能力优于PTGS技术，并使肝癌细胞的侵袭能力显著降低。