Production of a monoclonal antibody against oxytetracycline and its application for oxytetracycline residue detection in shrimp

• 来源期刊: 浙江大学学报（英文版）（B辑：生物医学和生物技术）
• 学科: 生物学
• 关键词: 土霉素 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定法(ELISA) 虾
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 页码范围: 165-172
• 页数: 8页
• 分类号: Q939.92
• 语种: 英文
• DOI: 10.1631/jzus.B1300181

摘要

本文题目：抗土霉素单克隆抗体的制备及其在虾中土霉素残留的检测应用Production of a monoclonal antibody against oxytetracycline and its application for oxy-tetracycline residue detection in shrimp研究目的：抗土霉素单克隆抗体的制备和特性分析，并用于间接竞争酶联免疫吸附测定法（icELISA）分析虾样品中土霉素的残留。创新要点：本研究建立分泌抗土霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，筛选出对虾中土霉素残留检测具有较高灵敏度的单克隆抗体2-4F。研究方法：用细胞杂交技术使土霉素-牛血清白蛋白偶联物免疫的BALC/c雌性小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，建立三株分泌抗土霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株（2-4F、7-3G和11-11A），并制备它们的单克隆抗体。通过 icELISA 法分析单克隆抗体对土霉素的半抑制质量浓度（IC50）和交叉反应率，明确其灵敏度和特异性。重要结论：实验结果发现单克隆抗体2-4F具有最高的灵敏度，对土霉素的IC50为7.01 ng/ml，且该单抗特异性强，仅与罗利环素之间有强烈的交叉反应，而与非相关抗生素不发生交叉反应。当利用单克隆抗体2-4F 检测虾样品中的土霉素含量时，其批内和批间回收率分别为82%~118%和96%~113%，变异系数分别为3.9%~13.9%和5.5%~14.9%。因此，单克隆抗体2-4F可用于虾产品中土霉素残留分析试剂盒的开发。