菜蛾斑蝥素受体PP2A催化亚基基因的原核表达与纯化

• 作者: 张志勇 张民照 杨宝东 王进忠 郑林青 郝少东
• 来源期刊: 环境昆虫学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小菜蛾 PP2Ac 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 711-717
• 分类号: Q966|S436.34
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0858.2014.05.8

摘要

为获得菜蛾斑蝥素受体PP2Ac蛋白,支持斑蝥素受体结合机理等相关研究,本试验以菜蛾cDNA为模板,利用PCR方法扩增得到菜蛾PP2Ac基因,将PP2Ac基因连接至经Hind Ⅲ与BamH Ⅰ双酶切处理的pET-30a原核表达栽体中,获得重组质粒并将其命名为pET30a-PX-PP2Ac.将pET30a-PX-PP2Ac转化至大肠杆茵BL21中进行诱导表达获得目的蛋白后,使用Ni-琼脂糖柱对重组蛋白进行纯化.结果表明,菜蛾PP2Ac基因可以在大肠杆菌中表达,目的蛋白在不同的温度下均以包涵体形式存在.优化后的诱导表达条件是IPTG浓度0.2 mM和温度30℃,目的蛋白大小约38 KD.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨宝东	农业应用新技术北京市重点实验室北京农学院植物科学技术学院	3	17	2.0	3.0
2	王进忠	农业应用新技术北京市重点实验室北京农学院植物科学技术学院	4	21	3.0	4.0
3	张志勇	农业应用新技术北京市重点实验室北京农学院植物科学技术学院	4	13	2.0	3.0
4	郑林青	农业应用新技术北京市重点实验室北京农学院植物科学技术学院	1	1	1.0	1.0
5	郝少东	农业应用新技术北京市重点实验室北京农学院植物科学技术学院	2	5	1.0	2.0