细胞因子组合体外扩增人NK细胞的研究

• 作者: 叶韵斌 周智锋 李洁羽 陈明水
• 来源期刊: 中华肿瘤防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: NK细胞 细胞因子 活化性受体 抑制性受体
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究/论著
• 页码范围: 193-197
• 分类号: R73-36
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5269.2014.03.008

摘要

目的:探讨细胞因子IL-2、IL 12、IL-15和IL 18组合对体外扩增人外周血来源的NK细胞受体表达及杀伤肿瘤细胞能力.方法:NK细胞的培养分为CIK组、IL-2+IL 15组和IL-2+ IL-12+ IL-15+ IL-18组;流式细胞术检测培养的细胞表型及NK细胞受体表达;LDH法检测不同效靶比NK细胞对不同肿瘤细胞株的杀伤作用.结果:外周血淋巴细胞经细胞因子IL-2 +IL-12+IL-15+IL-18组合作用下,17d后NK细胞(CD3-CD56+)比例上升至80％以上,NK细胞数扩增＞1 000倍,明显高于其他两组,F=37.154,P＜0.001.NK细胞活化标志CD69+分子增加(t=21.271,P＜0.001),NK细胞活化性受体(NKG2D、NKp30、NKp44和NKp46)均有不同程度上调(P值均＜0.05),而NK细胞抑制性受体CD158b(t=3.416,P=0.021)和CD159a(t=4.209,P=0.018)不同程度下调,T淋巴细胞、B淋巴细胞(CD19+)、单核巨噬细胞(CD14+)、调节性T细胞(T-reg)等均显著减少,P＜0.001.对扩增的NK细胞杀伤敏感的肿瘤细胞株均高表达MHC Ⅰ类相关蛋白A(major histocompatibility complex class Ⅰ chain related molecules A,MICA),MICA表达分别为K562(46.2±3.2)％、MCF-7(56.5±4.7)％、HTC-8(52.5±4.1)％和Eca-109(36.5±2.5)％,而对NK细胞抵抗的细胞株均低表达或不表达MICA分子,分别为Raji 0、MDA-MB-435s 0和HT-29(1.2±0.8)％.结论:细胞因子IL-2+IL-12+IL-15+IL 18组合能有效的扩增外周血来源NK细胞,上调其活化性受体,下调抑制性受体,其数量及功能均满足临床治疗需要.