抗Trx单克隆抗体用于血吸虫病诊断的研究

• 作者: 刘春会 吴玉龙 张珍 李波清 李雍龙 杜镇镇 程梅 耿丽
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 单克隆抗体 硫氧还蛋白 双抗夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1057-1061
• 分类号: R383.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2014.06.015

摘要

目的:建立双抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx).方法:用重组日本血吸虫Trx(rTrx)蛋白免疫BALB/c小鼠,筛选高滴度、高特异性的单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法.通过检测日本血吸虫排泄-分泌物(excretory-secretions,ES)与rTrx的浓度评价该方法的敏感性;通过对健康人血清的检测确定其特异性;通过对布氏姜片吸虫病、华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、囊虫病患者血清进行交叉反应试验,评价该方法的特异性.结果:获得2株稳定分泌抗rTrx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为McTrx1和McTrx2.以McTrx1为包被抗体,HRP-McTrx2为酶标抗体,建立的双抗体夹心ELISA可检测出ES的最低浓度为4.8 μg/ml,检测出rTrx的最低浓度为1.2 μg/ml.该方法的特异性为96％.结论:以抗rTrx蛋白单克隆抗体McTrxl与McTrx2为基础建立的双抗体夹心ELISA法具有较高的特异性.