PDGF对人RPE细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1表达的影响

• 作者: 江双红 瞿雯 聂玉红 艾明 蒋祖林 邢怡桥 项奕
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: 血小板源性生长因子 细胞外基质 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制剂 视网膜 眼色素上皮/细胞学 增生性玻璃体视网膜病变
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 6-11
• 页数: 6页
• 字数: 4893字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2014.01.002

摘要

背景 研究表明血小板源性生长因子(PDGF)能调节多种细胞中基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制剂(MMP/TIMP)的表达和平衡,但视网膜色素上皮(RPE)细胞中MMP/TIMP的表达与PDGF作用剂量和作用时间的关系尚不明确. 目的 观察PDGF对RPE细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1表达的影响.方法 体外培养人RPE细胞系ARPE-19,将达到70％ ～ 80％融合的细胞分为5个组.分别将0、0.1、1、10、50 mg/L PDGF加入RPE细胞培养基作用36 h,分别采用逆转录PCR(RT-R CR)法和Western blot法检测各组RPE细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA及其蛋白的表达.PDGF组采用10 mg/L PDGF组PDGF分别刺激RPE细胞24、36和48 h,对照组用不含PDGF的培养液培养,采用逆转录PCR(RT-RCR法和Western blot法分别检测RPE细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA及蛋白的表达. 结果 随着PDGF质量浓度的增加和刺激时间的延长,RPE细胞生长速度加快,细胞增生明显.PDGF刺激RPE细胞36 h,随着PDGF质量浓度的增加,MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA在RPE细胞中表达相对值逐渐增加,各组间差异均有统计学意义(MMP-2 mRNA:F=79.304,P=0.000;MMP-9 mRNA:F =-8.465,P=0.003),其中1、10、50 mg/L PDGF组RPE细胞中MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达相对值明显高于0 mg/L PDGF组,差异均有统计学意义(P＜0.05).RPE细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达相对值随着PDGF质量浓度的增加而逐渐增加,各组间差异均有统计学意义(MMP-2:F=26.550,P=0.000;MMP-9:F=80.993,P=0.000),其中1、10、50 mg/L PDGF组RPE细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达相对值明显高于0 mg/L PDGF组,差异均有统计学意义(P＜0.05).各质量浓度PDGF组RPE细胞中TIMP-1 mRNA和蛋白表达相对值差异均无统计学意义(F=0.143,P=0.962;F=1.955,P=0.178).随着10 mg/L PDGF刺激RPE细胞时间的延长,RPE细胞中MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达逐渐增加,差异均有统计学意义(MMP-2 mRNA:F时间=83.250,P=0.002;MMP-9 mRNA:F时间=6.785,P=0.019);各时间点RPE细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达相对值明显增加,差异均有统计学意义(MMP-2:F时间=11.185,P=0.041;MMP-9:F时间=968.413,P=0.000).PDGF作用不同时间点对照组与PDGF组间MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白在RPE细胞中的表达差异均有统计学意义(分组:均P=0.000,时间点:P＜0.05),而各时间点2个组间RPE细胞中TIMP-1表达相对值的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 PDGF上调PRE细胞中MMP-2和MMP-9的表达,其作用呈剂量和时间依赖性,但对PRE细胞中TIMP-1的表达无明显影响.PDGF导致RPE细胞中MMP/TIMP的平衡失调,从而导致细胞外基质的破坏,促进RPE细胞的迁移.