华扁穗草ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

• 作者: 包蕊 旭荣花 李毅 王莉 胡延萍
• 来源期刊: 中国草地学报
• 学科: 农学
• 关键词: 华扁穗草 ISSR-PCR 反应体系 正交试验设计 引物筛选
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 46-52
• 页数: 7页
• 分类号: S548
• 字数: 5556字
• 语种: 中文

摘要

利用正交试验设计方法,对影响华扁穗草ISSR-PCR反应中Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTP、引物和DNA模板等5个因素进行优化筛选,以期建立最佳反应条件.同时,筛选扩增条带清晰稳定的ISSR引物,经退火温度试验得到各个引物的最佳退火温度.结果表明:华扁穗草20μl ISSR-PCR最佳反应体系包括1.80 mmol/L Mg2+、0.80 U Taq DNA聚合酶、0.100 mmol/L dNTP、0.6umol/L引物和20ng DNA模板;筛选出扩增条带清晰稳定的10条引物.体系验证和引物筛选试验表明,其在华扁穗草不同个体中能够扩增出条带清晰、稳定性好的条带,可用于后续华扁穗草遗传多样性分析,为华扁穗草野生资源保护和优良牧草种质资源选育提供理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王莉	中国科学院西北高原生物研究所	133	1198	19.0	29.0
2	李毅	中国科学院西北高原生物研究所	83	854	15.0	27.0
3	胡延萍	中国科学院西北高原生物研究所	18	70	6.0	7.0
4	包蕊	中国科学院西北高原生物研究所	4	26	3.0	4.0