不同启动子在水稻悬浮细胞中诱导外源基因的表达

• 作者: 张炜 陈兆骞 陈熙
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 串联启动子 水稻 悬浮细胞系 绿色荧光蛋白 异源表达
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传育种?耕作栽培?生理生化
• 页码范围: 1208-1215
• 页数: 8页
• 分类号: S511.035.3
• 字数: 6416字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2014.06.004

摘要

为进一步提高外源基因在水稻悬浮细胞中的表达水平,以花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子为对照,克隆了玉米泛素蛋白启动子( Ubi)、水稻肌动蛋白启动子( Actin)以及水稻Oscc1启动子,以GFP为报告基因,通过启动子串联的方式,构建了10个植物表达载体：pCAMBIA 130435S-GFP、Ubi-GFP、Actin-GFP、Oscc1-GFP、35S/Ubi-GFP、35S/Actin-GFP、35S/Oscc1-GFP、Ubi/Actin-GFP、Ubi/Oscc1-GFP、Actin /Oscc1-GFP,采用根瘤农杆菌介导的方法,将表达载体导入日本晴胚性愈伤,经悬浮培养分别获得转基因的悬浮细胞系,利用荧光显微镜、酶标仪检测GFP荧光强度,用Western b1ot检测GFP蛋白质的表达水平。结果发现串联启动子明显强于单个启动子驱动的GFP蛋白质表达水平。在10个表达载体中,35S/Ubi、Ubi/Actin和Ubi/Oscc1是3种优化的启动子组合,其中Ubi/Oscc1串联启动子驱动GFP的表达水平最高,约为对照35S启动子的3倍。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张炜	南京农业大学生命科学学院	47	261	9.0	14.0
2	陈兆骞	南京农业大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0
3	陈熙	南京农业大学生命科学学院	6	69	3.0	6.0