稳定表达ClC-3对宫颈癌细胞顺铂敏感性的影响及其机制

• 作者: 徐彬 施静雯 杨清松 林嘉麟 王施思
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈肿瘤 抗药性,肿瘤 P糖蛋白 顺铂 ClC-3 HeLa细胞
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 888-893,907
• 页数: 7页
• 分类号: R737.33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2014.11.402

摘要

目的:探讨稳定表达电压门控氯通道3(voltage-gated chloride channel 3,ClC-3)的宫颈癌HeLa细胞对顺铂敏感性的变化及其可能的机制.方法:通过脂质体介导的方法将重组载体质粒pcDNA3.1/ClC-3转染至HeLa细胞中.pcDNA3.1/ClC-3转染后,蛋白质印迹法检测细胞中ClC-3蛋白和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达水平,实时荧光定量PCR法检测细胞中ClC-3和多药耐药基因1(multi-drug resistance gene 1,MDR1)mRNA的表达水平,MTT法检测顺铂对细胞增殖的影响,免疫荧光法检测细胞中ClC-3蛋白和P-gp的表达及定位.结果:成功获得稳定表达ClC-3的HeLa/ClC-3细胞.HeLa/ClC-3细胞中ClC-3蛋白和P-gp的表达水平以及MDR1和ClC-3 mRNA的表达水平均明显高于转染空载体pcDNA3.1的HeLa/mock细胞,差异有统计学意义(P＜0.05).与转染空载体pcDNA3.1的HeLa/mock细胞比较,顺铂对HeLa/ClC-3细胞增殖的抑制作用明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05),顺铂对HeLa/ClC-3细胞的半数抑制浓度(half inhititory concentration,IC50)为71μmol/L,明显高于HeLa/mock细胞的32 μmol/L (P＜0.05).ClC-3蛋白和P-gp共同定位于HeLa/ClC-3和HeLa/mock细胞的细胞膜.结论:ClC-3可降低HeLa细胞对顺铂的敏感性,可能与ClC-3上调P-gp的表达水平有关.