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摘要:
目的:探讨稳定表达电压门控氯通道3(voltage-gated chloride channel 3,ClC-3)的宫颈癌HeLa细胞对顺铂敏感性的变化及其可能的机制.方法:通过脂质体介导的方法将重组载体质粒pcDNA3.1/ClC-3转染至HeLa细胞中.pcDNA3.1/ClC-3转染后,蛋白质印迹法检测细胞中ClC-3蛋白和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达水平,实时荧光定量PCR法检测细胞中ClC-3和多药耐药基因1(multi-drug resistance gene 1,MDR1)mRNA的表达水平,MTT法检测顺铂对细胞增殖的影响,免疫荧光法检测细胞中ClC-3蛋白和P-gp的表达及定位.结果:成功获得稳定表达ClC-3的HeLa/ClC-3细胞.HeLa/ClC-3细胞中ClC-3蛋白和P-gp的表达水平以及MDR1和ClC-3 mRNA的表达水平均明显高于转染空载体pcDNA3.1的HeLa/mock细胞,差异有统计学意义(P<0.05).与转染空载体pcDNA3.1的HeLa/mock细胞比较,顺铂对HeLa/ClC-3细胞增殖的抑制作用明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),顺铂对HeLa/ClC-3细胞的半数抑制浓度(half inhititory concentration,IC50)为71μmol/L,明显高于HeLa/mock细胞的32 μmol/L (P<0.05).ClC-3蛋白和P-gp共同定位于HeLa/ClC-3和HeLa/mock细胞的细胞膜.结论:ClC-3可降低HeLa细胞对顺铂的敏感性,可能与ClC-3上调P-gp的表达水平有关.
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文献信息
篇名 稳定表达ClC-3对宫颈癌细胞顺铂敏感性的影响及其机制
来源期刊 肿瘤 学科 医学
关键词 宫颈肿瘤 抗药性,肿瘤 P糖蛋白 顺铂 ClC-3 HeLa细胞
年,卷(期) 2014,(10) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 888-893,907
页数 7页 分类号 R737.33
字数 语种 中文
DOI 10.3781/j.issn.1000-7431.2014.11.402
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宫颈肿瘤
抗药性,肿瘤
P糖蛋白
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ClC-3
HeLa细胞
研究起点
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期刊影响力
肿瘤
月刊
1000-7431
31-1372/R
大16开
上海市斜土路2200弄25号
4-289
1981
chi
出版文献量(篇)
4424
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