骨髓间充质干细胞移植对缺血-再灌注损伤视网膜中Fas/FasL及caspases-3表达的影响

• 作者: 张杰 张芳芹 曹永亮 王晓莉 范姗姗 赵岩松
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: 器官移植 间充质干细胞 视网膜 缺血-再灌注损伤 凋亡
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 36-40
• 页数: 5页
• 字数: 4064字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2014.01.008

摘要

背景 视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)严重影响视力,其损伤机制是视网膜细胞的凋亡,治疗效果不佳.研究证实骨髓间充质干细胞(BMSCs)视网膜下移植后可显著减轻RIRI,而BMSCs视网膜移植所产生的神经保护机制是否与其抑制凋亡作用有关目前尚不清楚. 目的 观察BMSCs视网膜下移植对RIRI大鼠视网膜中凋亡相关因子Fas/FasL和caspases-3蛋白表达的影响,探讨BMSCs移植治疗RIRI的神经保护机制.方法 无菌条件下分离SD大鼠的股骨和胫骨骨髓,离心收集细胞后用DMEM低糖培养液制成骨髓细胞悬液,体外培养大鼠BMSCs,并以1×106 ～2×106个/ml的细胞密度和1∶2进行传代.64只清洁级健康成年SD大鼠按随机数字表法随机分为正常对照组、模型对照组、BMSCs移植组及PBS对照组,每组16只.用视神经线栓法制备大鼠视网膜RIRI模型,BMSCs移植组大鼠于造模后24 h视网膜下注入5×104个活BMSCs,PBS对照组以同样的方式注入PBS.用颈椎脱臼法处死大鼠,制备16 μm厚视网膜切片.采用免疫组织化学法动态观察BMSCs移植后6、24、48、72 h各组大鼠视网膜中Fas、FasL及caspase-3蛋白表达的变化.结果 BMSCs视网膜下移植后72 h,荧光显微镜观察可见视网膜下Hoechst33324阳性细胞.BMSCs视网膜下移植后6、24、48、72 h,正常对照组大鼠视网膜仅见微量Fas、FasL和caspase3的阳性表达;BMSCs视网膜下移植后各时间点,模型对照组与BMSCs移植组大鼠视网膜均可见Fas、FasL、caspase-3阳性表达细胞,免疫组织化学染色强度和细胞数量值均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.01).随着BMSCs移植时间的延长,各组大鼠视网膜中Fas、FasL及caspase-3阳性细胞数均逐渐下降,各时间点BMSCs移植组大鼠视网膜中Fas、FasL、caspase-3的阳性表达值均明显低于模型对照组和PBS对照组大鼠,差异均有统计学意义(P＜0.05),但各时间点模型对照组与PBS对照组间大鼠视网膜中Fas、FasL、caspase-3阳性细胞数变化的差异均无统计学意义(均P＞0.05). 结论 视网膜下移植BMSCs可下调RIRI大鼠视网膜中凋亡相关蛋白Fas、FasL及caspase-3的表达,从而减轻RIRI大鼠视网膜神经节细胞的凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张芳芹	潍坊医学院附属医院超声科	2	3	1.0	1.0