三重PCR检测黄瓜炭疽病菌、菌核病菌和细菌性萎蔫病菌

• 作者: 王伟 王楠
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄瓜炭疽病菌 黄瓜菌核病菌 黄瓜细菌性萎蔫病菌 分子检测 三重PCR
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 病原学
• 页码范围: 129-138
• 页数: 10页
• 分类号: S436.421.1
• 字数: 4267字
• 语种: 中文

摘要

本试验建立一种可同时检测黄瓜炭疽病(Colletotrichum orbiculare)、黄瓜菌核病(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.) de Bary)和黄瓜细菌性萎蔫病(Erwinia tracheiphila)等黄瓜主要病害病原菌的三重PCR检测体系.采用正交试验设计方法,对三重PCR的影响因素分析研究,进行退火温度优化,并以3个引物组、Taq DNA聚合酶、dNTP和Mg2+共6因素3水平进行多重PCR体系优化,成功建立了适合黄瓜主要病害的三重PCR最佳检测体系,即25 μL的反应体系中含有0.24 μmol·L-1 CY1/CY2;0.72 μmol·L-1 SSFWD/SSREV;0.336 μmol·L-1 ET-P1/ET-P2;1 UTaq聚合酶;0.15 mmol· L-1 dNTP;1 mmol·L-1MgCl2,最适退火温度为63℃.该方法能够快速从田间黄瓜发病植株和根围土壤中将黄瓜炭疽病菌、黄瓜菌核病菌和黄瓜细菌性萎蔫病菌检测出来,灵敏度可以达到10 pg·μL-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟	华东理工大学生物工程学院/生物反应器工程国家重点实验室	53	487	12.0	20.0