探讨 CM-DiI 标记大鼠原代肝细胞的最佳浓度、细胞的移植量和移植途径.采用原位胶原酶灌注和密度梯度离心法分离、纯化大鼠肝细胞,用不同浓度 CM-DiI 进行标记,筛选出 CM-DiI 的最佳标记浓度,分别从门静脉、尾静脉移植到2/3肝切除0 h 大鼠,对细胞移植36 h 后的肝组织石蜡切片和冰冻切片分别进行免疫组织化学分析和荧光观察.结果显示,4μmol?mL -1浓度的 CM-DiI 和肝细胞孵育5 min ,细胞标记率高达95%.每克大鼠残肝移植0.8 mL的细胞悬液(107个?mL -1)和0.2,0.4,0.6 mL 移植后检测到的标记细胞数目相比有显著性差异(P<0.01),经肝门静脉移植后可以检测到的标记细胞数比尾静脉多(P<0.01).CM-DiI 标记大鼠原代肝细胞的最佳浓度为4μmol?mL -1,标记细胞的最佳移植量为每克大鼠残肝移植0.8 mL 的细胞悬液(107个?mL -1)、最佳移植途径为经肝门静脉移植.