雪松疫霉(Phytophthora lateralis)的快速分子检测

• 作者: 廖太林 张正光 李百胜 王健生 纪睿 郑小波
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 雪松疫霉 分子检测 PCR
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 病原学
• 页码范围: 113-120
• 页数: 8页
• 分类号: S41-30
• 字数: 3671字
• 语种: 中文

摘要

由雪松疫霉(Phytophthora lateralis)引起的疫病是一类植物检疫性病害.为建立该病原菌的快速检测技术,本文比较分析了雪松疫霉和其他疫霉的tRNA序列,在此基础上设计了一对检测雪松疫霉的特异性引物T1/T2,该对引物从雪松疫霉中扩增得到1条192 bp的条带,而其他15种疫霉和其他真菌菌株均无扩增条带,表明该对引物对雪松疫霉具有特异性.在25 μL PCR反应体系中,引物T1/T2检测灵敏度为10 pg基因组DNA;而以引物T3/T4和T1/T2进行巢式PCR扩增,能够检测到1fg基因组DNA,使检测灵敏度提高了10 000倍.该检测体系对灭菌水中游动孢子的检测灵敏度可达0.5个游动孢子,对人工接种发病的植物组织能够特异性地检测到该病原菌.此外,进一步建立了该病原菌的实时荧光定量PCR检测体系.