流式细胞术分析苜蓿相对DNA含量的样品处理方法

• 作者: 刘倩 魏臻武
• 来源期刊: 草业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 苜蓿 流式细胞术 酶解法 细胞核提取缓冲液
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 植物生产层
• 页码范围: 1718-1723
• 页数: 6页
• 分类号: S816|S551+.7
• 字数: 5745字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11829\j.issn.1001-0629.2014-0096

摘要

为制备用于流式细胞仪分析的高纯度苜蓿(Medicago sativa)细胞核悬液,筛选最适合流式细胞仪分析的苜蓿细胞核提取方法,选用江苏地方品种淮阴苜蓿为供试材料,分别采用酶解法和机械解离法提取苜蓿细胞核悬液;用5种细胞核分离缓冲液及两种混合酶解液制备样品,根据各自优缺点筛选最适宜的苜蓿细胞核提取法.在机械法所用的5种细胞核提取缓冲液中,LB01缓冲液提取效果最好,提取的细胞核形态及内部结构完整,获得的细胞核量多.利用两种混合酶液制备苜蓿细胞核悬液,均出现倍性明显的峰,混合酶液Ⅰ制备的单细胞核悬液优于混合酶液Ⅱ,且酶解法制备细胞核悬液,可获得数量更多更完整的原生质体.但利用酶解法制备细胞核原生质体,其悬浮液中杂质多,需时较长.结果表明,LB01缓冲液为最适合制备苜蓿细胞核悬液的提取缓冲液.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏臻武	扬州大学动物科学与技术学院	51	386	11.0	16.0
2	刘倩	扬州大学动物科学与技术学院	8	68	4.0	8.0