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摘要:
以新疆大叶苜蓿(Medicago sativa‘ Xinjiang Daye’)叶片作为转化受体,利用农杆菌介导法将从梭梭(Haloxylon ammodendron)中获得的甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)转化紫花苜蓿,研究选择剂卡那霉素对愈伤组织分化的影响,并采用正交试验设计优化了影响紫花苜蓿转化的4个主要因子,建立了农杆菌介导的紫花苜蓿高效转化体系,获得了转基因植株.结果表明:卡那霉素在愈伤组织分化培养时的上限浓度以50 mg·L-1为宜;转化过程中当浸染时间为5 min,菌液浓度OD600为0.2,外植体预培养6d,共培养后清洗外植体的头孢雷素(Cef)浓度为800 mg·L-1是最佳转化方案,抗性芽分化率达到65.5%;4个因子中菌液浓度对转化率影响最大,清洗外植体的Cef浓度和浸染时间影响次之,外植体预培养时间的影响最小.经PCR和RT-PCR检测,初步证明了BADH基因已经整合到紫花苜蓿中,转化率为16.0%.
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文献信息
篇名 新疆大叶紫花苜蓿BADH基因转化体系的研究
来源期刊 草地学报 学科 生物学
关键词 紫花苜蓿 转化 农杆菌 BADH基因 转基因植株
年,卷(期) 2014,(2) 所属期刊栏目 研究论文
研究方向 页码范围 359-365
页数 7页 分类号 Q943.2
字数 5350字 语种 中文
DOI 10.11733/j.issn.1007-0435.2014.02.023
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 宋玉霞 宁夏农林科学院农业生物技术研究中心 35 239 9.0 14.0
2 石磊 宁夏农林科学院农业生物技术研究中心 11 27 4.0 5.0
3 甘晓燕 宁夏农林科学院农业生物技术研究中心 18 33 4.0 4.0
4 陈虞超 宁夏农林科学院农业生物技术研究中心 17 33 4.0 5.0
5 聂峰杰 宁夏农林科学院农业生物技术研究中心 16 27 4.0 4.0
6 张丽 宁夏农林科学院农业生物技术研究中心 16 32 4.0 5.0
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紫花苜蓿
转化
农杆菌
BADH基因
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草地学报
双月刊
1007-0435
11-3362/S
大16开
北京海淀圆明园西路2号中国农业大学动科大楼152室
80-135
1991
chi
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