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摘要:
厌氧真菌能够产生高比活力的纤维素酶,但由于对厌氧环境的生产条件要求严格,生长速度缓慢,并不适合规模生产。本研究将厌氧真菌内切型-β-葡聚糖酶基因af1与大肠杆菌表达载体pET-28a (+)连接,得到重组质粒pET-28a(+)-af1。以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,重组质粒转化后获得重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-af1。采用SDS-PAGE蛋白电泳对重组大肠杆菌的表达产物进行分析,在40 kDa附近得到与目的基因af1表达蛋白理论值相当的明显条带。AF1酶蛋白的最适pH为6.0,最适温度为45°C。重组大肠杆菌的摇瓶产酶试验结果显示:诱导培养18 h时,内切型-β-葡聚糖酶(CMC酶)活力可达410 U/mL。该项研究工作为进一步构建内切型-β-葡聚糖酶高产菌株奠定了良好的基础。
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文献信息
篇名 厌氧真菌内切型-β-葡聚糖酶基因af1在大肠杆菌中的表达
来源期刊 科技通报 学科 生物学
关键词 生物化工 厌氧真菌 内切型-β-葡聚糖酶 重组大肠杆菌 基因表达
年,卷(期) 2014,(1) 所属期刊栏目 生物科学
研究方向 页码范围 44-48
页数 5页 分类号 Q786
字数 2725字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 夏黎明 浙江大学化学工程与生物工程学系 102 1653 24.0 34.0
2 金欣 浙江大学化学工程与生物工程学系 14 73 4.0 8.0
6 孟楠 浙江大学化学工程与生物工程学系 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
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生物化工
厌氧真菌
内切型-β-葡聚糖酶
重组大肠杆菌
基因表达
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