乙型脑炎病毒可视化分型基因芯片的制备

• 作者: 孙文超 朱羿龙 温树波 王茂鹏 田宇飞 盛媛 薛斐 辛舒 阎富龙
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型脑炎病毒 基因型 基因芯片 可视化
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 377-380,390
• 页数: 5页
• 分类号: R373.31|Q78
• 字数: 3871字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.03.017

摘要

目的:制备乙型脑炎病毒(JEV)可视化分型基因芯片.方法:根据JEV的基因组序列,应用生物学软件设计JEV分型引物及探针,制备其可视化分型基因芯片;用生物素标记的引物PCR扩增目的片段,并与固定于玻片上的探针杂交,加入链霉亲和素标记的纳米金,银增强实现可视化;进行特异性、灵敏性及重复性试验.结果:探针特异地与相应的标记目的基因片段杂交,并在芯片上呈现较强的阳性杂交信号;2号探针能特异性检出JEV,3、4号探针可分别对Ⅰ型和Ⅲ型JEV进行分型;芯片对JEV质粒检测的灵敏度达1 05拷贝/mL;以蓝耳病病毒等5种病毒为对照,芯片只对JEV响应,具有特异性;制备的基因芯片具有批间、批内重复性.结论:制备的基因芯片具有高特异性、灵敏性及重复性,可以快速、准确、高通量地对JEV进行可视化分型检测.